Biochemical Oxygen Demand Test 9

เมื่อ  DO₀  คือ ปริมาณออกซิเจนเริ่มต้น

        DO₅  คือ ปริมาณออกซิเจนที่จุลินทรีย์ใช้ย่อยสลายแบคทีเรีย (สุดท้าย)

เครื่องมือและอุปกรณ์

1.       ขวดบีโอดี ขนาด 300 มล.

2.        ขวดน้ำกลั่น + จุกยาง

3.       กระบอกตวง ขนาด 100 มล.

4.       ปิเปตต์

5.       ชุดการไตเตรท

6.       บีกเกอร์

สารเคมี

1.             สารละลายแมงกานีสซัลเฟต (MnSO₄.H₂O)

2.             สารละลายอัลคาไล-ไอโอไดด์-เอไซด์ (AIA)

3.             กรดซัลฟูริกเข้มข้น (H₂SO₄conc)

4.             น้ำแป้ง (Solution)

5.             สารละลายโซเดียมไธโอซัลเฟต 0.0250 N (Na₂S₂O₃.5H₂O)

6.             สารละลายมาตรฐานโพแทสเซียมไอโอไดด์ (KI)

7.             น้ำตัวอย่าง

วิธีการทดลอง

          1) นำน้ำตัวอย่างที่ผ่านการบ่มไว้แล้วเป็นเวลา 5 วัน มาปรับอุณหภูมิให้อยู่ที่อุณหภูมิห้องโดยการแช่ขวดบีโอดีน้ำตัวอย่างลงในอ่างน้ำ

          2)  เติมแมงกานีสซัลเฟต (MnSO₄H₂O)   1.5 มล. โดยใช้ปิเปต  ดูดขึ้นมา วิธีเติมให้จุ่มปิเปตลงไปกลางขวดและค่อยๆ ปล่อยสารออกไป
          3) เติม Alkali – iodine acid (AIA)  1.5 มล.โดยใช้ปิเปตขนาด 1 มล.ดูดขึ้นมา โดยวิธีเติมให้เช่นเดียวกับการเติมแมงกานีสซัลเฟต

         4) ปิดฝาและเขย่าขวดบีโอดี การเขย่าขวดบีโอดี ให้จับขวดโดยให้นิ้วชี้กดฝาขวดไว้ แล้วพลิกไปมาประมาณ 15 ครั้ง ตั้งทิ้งไว้อย่างน้อย 5 นาที จะมีตะกอนเกิดขึ้น
         5) เติมกรดซัลฟุริกเข้มข้น ( H₂SO₄ cone) 2 มล. โดยใช้ปิเปตขึ้นมา วิธีเติมให้ปลายปิเปตแตะข้างขวดและค่อยๆ ปล่อยสารลงไป ปิดฝาและเขย่าขวดบีโอดีอีกครั้ง การเขย่าขวดบีโอดี ให้จับขวดโดยให้นิ้วชี้กดฝาขวดไว้ แล้วพลิกไปมาจนตะกอนหายไป

         6) ตวงน้ำตัวอย่างในกระบอกตวงขนาด100มล.ออกมา98มล.เพราะฉะนั้นจะเหลือน้ำในขวดบีโอดี202มล.

7)      นำน้ำตัวอย่างที่เหลือในขวดบีโอดี ไปไตเตรทด้วยสารละลายโซเดียมไธโอซัลเฟต (Na₂S₂O₃) ความเข้มข้น 0.026 N ที่เตรียมไว้ จนน้ำตัวอย่างเปลี่ยนเป็นสีน้ำฟางข้าว

8)      หยดน้ำแป้งประมาณ 10 หยด ลงในน้ำตัวอย่าง  น้ำตัวอย่างจะเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงิน ทำการไต

เตรทต่อจนสีน้ำเงินหายไป  จดบันทึกปริมาณสารละลายโซเดียมไธโอซัลเฟตที่ใช้ไป  แล้วบันทึกผล

ข้อควรระวังในการทดลอง

-              การเติมสาร AIA และ MnSO₄ ควรจุ่มให้ปลายปิเปตต์ลงไปกลางขวดบีโอดี แล้วค่อยๆปล่อยสารลงไป เพราะจะทำให้สารกระจายไปได้ทั่วขวด

-              การเติมกรด H₂SO₄ conc ควรแตะปลายปิเปตต์ที่ปากขวดบีโอดี หากกรดเข้มข้นสัมผัสกับน้ำอาจทำให้เกิดการปะทุได้

-              หลังเติมกรด H₂SO₄ conc แล้ว ก่อนการเขย่าควรนำขวดบีโอดีไปเขย่าที่อ่างน้ำ ปิดฝาขวด เทกรดที่ล้นปากขวดออก โดยไม่ให้กรดสัมผัสกับผิวหนัง

-              ก่อนทำการไทเทรตควรกลั่วบิวเรตด้วยสารนั้น แล้วจึงบรรจุสารลงไป

-              ในการเปิดฝาขวดบีโอดีควรค่อยๆหมุนและค่อยๆดึงขึ้นเรื่อยๆ